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在细胞培养过程中，经常少不了HEPES缓冲液。那么，HEPES缓冲液的配制和使用方法怎样呢?HEPES缓冲液是一种弱势，在开放式的培养条件中，若加入HEPES，可防止培养基内pH氧化升高，从而将PH维持在7.0左右。HEPES分子量为238.31，化学名：4-羟乙基哌嗪乙磺酸，分子式:C8H18N2O4S。HEPES常用于生物缓冲剂，pH值缓冲范围：6.8-8.2，用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L。国内AVT注射用HEPES已登记。备案登记号HEPES现货供应

生物缓冲剂在生物实验中会经常被用到，它们种类繁多，可能你需要的缓冲剂和你选的缓冲剂表面符合，实际使用时就存在一定的差异，所以选好合适的缓冲剂是很有必要的；同时，不同缓冲液差别也很大。湖北新德晟带你来聊聊Tris-HCl缓冲液与HEPES缓冲液的之间的区别。Tris-HCl缓冲液Tris缓冲液是在生物化学研究中使用较***的一种缓冲剂，其本身为弱碱，常用有效pH在“中性”范围，Tris-HCl缓冲液：pH＝7.5～8.5；Tris-磷酸盐缓冲液：pH＝5.0～9.0。Tris-HCl缓冲液优点1、Tris-HCl缓冲液稳定，与生理体液的相容性好（Tris-HCl与钙、镁离子不会形成沉淀；相反，磷酸盐与钙、镁离子会产生沉淀）；2、而且相同PH，相同浓度的Tris-HCl缓冲液的离子强度低，这对酶类测定尤为重要，因为大离子强度易致有些酶失活。因此，有时用Tris-HCl代替磷酸盐缓冲液，效果更好。江苏大批量HEPES实验室采购国内艾伟拓稳定供货注射级HEPES！

1MHEPES缓冲液用注射级水配制,经过无菌过滤,其浓度为238.3g/L。HEPES是一种生物缓冲液,化学性质稳定,对温度和浓度变化不敏感。在pH7.2-7.6范围内,较碳酸氢钠缓冲液的缓冲能力更强。1.产品用途：常用的缓冲体系的一部分，可作为细胞培养基添加组分，维持pH恒定，推荐浓度为10-25nM。HEPES缓冲液在细胞培养过程中起什么作用？HEPES是一种弱酸，中文名字是羟乙基哌嗪乙硫磺酸，主要作用是防止培养基PH迅速变动。在开放式培养条件下，观察细胞时，由于培养基脱离了5%二氧化碳的环境，培养液中的二氧化碳迅速逸出，导致PH值迅速升高。若培养液加了HEPES,就可以维持在PH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES.

储存方法：HEPES缓冲液在2-8℃下可保存1年。注意事项：HEPES缓冲液运输时需要加冰袋。但储存时避免冷冻，否则会有盐类物质析出。N-三(羟甲基)甲基甘氨酸Tricine，CAS是5704-04-1，是一种两性离子缓冲液，名字由Tris和glycine衍生而来，结构类似于Tris，但是高浓度具有比Tris更弱的抑制性，也是“Good”缓冲液之一，**初开发用于提供叶绿体反应的缓冲体系。Tricine的有效pH缓冲范围为7.4-8.8，pKa=8.1（25℃），常用做电泳缓冲液，以及用来重悬细胞沉淀。Tricine具有低负电荷和高离子强度的特性，非常适用于电泳分离1~100kDa的低分子量蛋白。基于萤火虫荧光素酶的ATP分析实验中，比较10种常见的缓冲液，Tricine（25mM）表现出比较好的检测效果。另外，在自由基诱导的膜损伤实验中，Tricine还是一种有效的羟自由基清除剂。作者：泰安格林化工链接：GMP条件下生产艾伟拓注射级HEPES。

Tris-HCl缓冲液缺点：1、温度效应大，如4℃时pH=8.4，37℃时pH=7.42、pH值受溶液浓度影响较大，稀释十倍，pH值的变化大于0.1；3、对某些pH电极发生一定的干扰作用，所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。4、易吸收空气中的CO2，所以配制的缓冲液要盖严密封。HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液，其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力，常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。HEPES缓冲液优点：pKa值介于6.0和8.0之间；在水中具有高溶解度；具有膜不透性，不易穿透生物膜；对生化反应影响有限，可耐化学和酶解作用，且不与金属离子生成复合物或沉淀；有极低的可见光和紫外光吸收；离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;HEPES缓冲液缺点：如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时，会产生细胞毒性的H2O2；HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果；而配置成溶剂后，要在4℃下保存，建议在短期内使用效果更佳；HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内，不能直接长时间照射阳光。GMP条件下生产注射级HEPES。江苏供注射用HEPES价格

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(1)hepes缓冲液可按所需的浓度直接加入到配制的培养液中,再过滤除菌.每1000ml培养液中加入2.38克HEPES,待溶后用lNNaOH调pH至7.2,滤过除菌后使用.此时HEPES的使用浓度为10mmol/L.(2)亦可配成100x贮存液（lmol/L），使用前取99ml培养液加入lml贮存液，**终应用浓度仍为10mmol/L。lmol/L（100x）hepes缓冲液配制方法:取23.8gHEPES溶于90ml双蒸水中,用lNNaOH调pH至7.5一8.0,然后用水定容至100ml,过滤除菌,分装小瓶（2ml/瓶）,4℃或-20℃保存.作者：知乎用户0mmkBe备案登记号HEPES现货供应

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